Efeito da técnica de coleta e do estágio do ciclo estral na recuperação de oócitos de boa qualidade em felinos e caninos domésticos / The effect of recovery technique and stage of estrous cycle on the recoveryof good quality oocytes in domestic felines and canines

A obtenção de oócitos de boa qualidade é essencial para o sucesso de diversas biotécnicas reprodutivas. Objetivou-se determinar o efeito de duas técnicas na recuperação de oócitos de boa qualidade em gatas e cadelas em diferentes estágios reprodutivos. Foram utilizados 43 pares de ovários de gata e 35 de cadela após realização da ovariosalpingohisterectomia eletiva. A fase do ciclo estral foi classificada em inativa, folicular ou luteal. Os ovários da fase folicular foram divididos em três grupos: PUN) punção dos folículos com agulha; PUN+FAT) fatiamento do mesmo ovário já puncionado; e FAT) fatiamento do segundo ovário. Os ovários das fêmeas em fase luteal e inativa foram submetidos ao FAT. Foram obtidos no total 974 oócitos (~23/animal) nas fêmeas felinas e 940 (~27/animal) nas caninas. O fatiamento recuperou número superior (P0,05) entre as técnicas de coleta na qualidade de estruturas recuperadas. A quantidade de oócitos recuperados em cada fase foi similar (P>0,05). Contudo, a fase inativa foi superior à luteal (P<0,05) e semelhante à folicular na quantidade de oócitos de boa qualidade em gatas e não houve diferença em cadelas. Conclui-se que o fatiamento recupera maior quantidade de oócitos, não influenciando em sua qualidade. As fases inativa e folicular recuperam maior quantidade de oócitos de boa qualidade em gatas e não afetam a recuperação em cadelas. Portanto, para otimizar o uso das biotecnologias, deve-se levar em consideração o estágio do ciclo estral em fêmeas felinas e a técnica de coleta utilizada na recuperação de oócitos.

The recovery of good quality oocytes is essential for the success of various reproductive biotechniques. The aim of this study was to determine the effect of two techniques on the recovery of good quality oocytes in queens and bitches at different reproductive stages. A total of 43 pairs of ovaries of queens and 35 of bitches after elective ovariosalpingohisterectomy were performed. The estrous cycle phase was classified as inactive, follicular or luteal. The ovaries of the follicular phase were allocated into three groups: PUN) puncture of the follicles with a needle; PUN + SLI) slicing of the same ovary already punctured; and SLI) slicing of the second ovary. The ovaries of luteal and inactive females were submitted to SLI. A total of 974 oocytes (~23/animal) were obtained in feline females and 940 (~27/animal) in canines females. The SLI technique recovered superior number (P0.05) between the collection techniques in the quality of recovered structures. The number of oocytes recovered in each phase was similar (P>0.05). However, the inactive phase was higher than luteal (P<0.05) and similar to the follicular phase in the quantity of good-quality oocytes in queens and there was no difference in bitches. In conclusion, it is preferable to perform the slicing technique to recover more oocytes in both species. Moreover, in queens it is possible to obtain good quality oocytes in the inactive phase and in bitches the estrous cycle phase does not influence the quality.

Efeito da técnica de coleta e do estágio do ciclo estral na recuperação de oócitos de boa qualidade em felinos e caninos domésticos / The effect of recovery technique and stage of estrous cycle on the recovery of good quality oocytes in domestic felines and canines

A obtenção de oócitos de boa qualidade é essencial para o sucesso de diversas biotécnicas reprodutivas. Objetivou-se determinar o efeito de duas técnicas na recuperação de oócitos de boa qualidade em gatas e cadelas em diferentes estágios reprodutivos. Foram utilizados 43 pares de ovários de gata e 35 de cadela após realização da ovariosalpingohisterectomia eletiva. A fase do ciclo estral foi classificada em inativa, folicular ou luteal. Os ovários da fase folicular foram divididos em três grupos: PUN) punção dos folículos com agulha; PUN+FAT) fatiamento do mesmo ovário já puncionado; e FAT) fatiamento do segundo ovário. Os ovários das fêmeas em fase luteal e inativa foram submetidos ao FAT. Foram obtidos no total 974 oócitos (~23/animal) nas fêmeas felinas e 940 (~27/animal) nas caninas. O fatiamento recuperou número superior (P<0,05) de oócitos. Não houve diferença (P>0,05) entre as técnicas de coleta na qualidade de estruturas recuperadas. A quantidade de oócitos recuperados em cada fase foi similar (P>0,05). Contudo, a fase inativa foi superior à luteal (P<0,05) e semelhante à folicular na quantidade de oócitos de boa qualidade em gatas e não houve diferença em cadelas. Conclui-se que o fatiamento recupera maior quantidade de oócitos, não influenciando em sua qualidade. As fases inativa e folicular recuperam maior quantidade de oócitos de boa qualidade em gatas e não afetam a recuperação em cadelas. Portanto, para otimizar o uso das biotecnologias, deve-se levar em consideração o estágio do ciclo estral em fêmeas felinas e a técnica de coleta utilizada na recuperação de oócitos.

The recovery of good quality oocytes is essential for the success of various reproductive biotechniques. The aim of this study was to determine the effect of two techniques on the recovery of good quality oocytes in queens and bitches at different reproductive stages. A total of 43 pairs of ovaries of queens and 35 of bitches after elective ovariosalpingohisterectomy were performed. The estrous cycle phase was classified as inactive, follicular or luteal. The ovaries of the follicular phase were allocated into three groups: PUN) puncture of the follicles with a needle; PUN + SLI) slicing of the same ovary already punctured; and SLI) slicing of the second ovary. The ovaries of luteal and inactive females were submitted to SLI. A total of 974 oocytes (~23/animal) were obtained in feline females and 940 (~27/animal) in canines females. The SLI technique recovered superior number (P<0.05) of oocytes. There was no difference (P>0.05) between the collection techniques in the quality of recovered structures. The number of oocytes recovered in each phase was similar (P>0.05). However, the inactive phase was higher than luteal (P<0.05) and similar to the follicular phase in the quantity of good-quality oocytes in queens and there was no difference in bitches. In conclusion, it is preferable to perform the slicing technique to recover more oocytes in both species. Moreover, in queens it is possible to obtain good quality oocytes in the inactive phase and in bitches the estrous cycle phase does not influence the quality.

Ultrasonographic evaluation of hG-CSF transgenic goat conceptus / Avaliação ultrassonográfica de conceptos transgênicos para o hG-CSF

The objective of this study was to evaluate the development of transgenic (T) goat embryos and fetuses for human Granulocyte Colony Stimulating Factor (hG-CSF) by ultrasonography. Four pregnancies in non-transgenic (NT) goats were obtained after fertilization (either fixed-time artificial insemination or natural mating) using the T male for hG-CSF. Ultrasound examinations were carried out at 30, 40 (transrectal via), 50, 60, 90 and 120 days of pregnancy (transabdominal via). Some parameters were observed such as morphology, organogenesis and formation of skeletal fetuses, viability with cardiac activity and fetuses movements. Measurements were taken of the crown-rump length, diameter of embryonic vesicle, thorax, abdomen, umbilical cord and placentomes. After parturition, DNA testing was conducted in all offspring and 4 T and 2 NT kids were identified. The conceptus started their differentiation at 40 days. The heart was detected in all examinations and the heart chambers were assessed at 50 days. Gastric compartments, liver and kidneys were observed at 60 days, the same period that all bony structures were visualized. Average values of all evaluated parameters had a gradual increase with the progression of pregnancy. T and NT goat embryos and fetuses had a similar growth and all remained viable throughout the experimental period.

O objetivo deste estudo foi avaliar o desenvolvimento de embriões e fetos transgênicos (T) para o Fator Estimulante de Colôniasde Granulócitos humano (hG-CSF) por ultrassonografia. Quatro gestações em cabras não transgênicas (NT) foram obtidas pos fecundação (inseminação artificial em tempo fixo ou monta controlada) utilizando o bode T para o hG-CSF. Exames ultrassonográficos foram realizados aos 30, 40 (via transretal), 50, 60, 90 e 120 dias de gestação (via transabdominal). Alguns parâmetros foram observados como morfologia, organogênese e formação do esqueleto fetal, viabilidade por meio de atividade cardíaca e movimento fetal. As seguintes mensurações foram realizadas: comprimento crânio caudal, diâmetro da vesícula embrionária, do tórax, do abdomen, do cordão umbilical e dos placentomas. Após o parto, o exame por PCR foi conduzido em todas as crias e 4 T e 2NT foram identificadas. O concepto iniciou sua diferenciação aos 40 dias. O coração foi detectado em todos os exames e as câmeras cardíacas foram identificadas aos 50 dias. Compartimentos gástricos, fígado e rins foram observados aos 60 dias, o mesmo período que todas as estruturas ósseas foram visualizadas. Valores médios de todos os parâmetros avaliados tiveram um aumento gradual com o avanço da gestação. Embriões e fetos T e NT tiveram um crescimento similar e todos permaneceram viáveis durante o período experimental.